Milieu de culture

TUNLAB propose des milieux de culture qui permettent uniquement la culture de certains genres de micro-organismes. Pour cela on ajoute des éléments qui inhibent la croissance des micro-organismes indésirables comme le chlorure de sodium à forte concentration, le thiosulfate de sodium, le cristal violet ou certains antibiotiques, etc.

il se compose d’une base (agar-agar, eau, minéraux…) ainsi que d’un indicateur coloré de pH ou de réaction d’oxydo-réduction pour permettre de formuler des hypothèses sur le genre.

Il existe aussi des bouillons de culture qui possèdent la même fonction, mais ces milieux ne contiennent pas d’agar-agar, ils sont donc totalement liquides.

Un milieu de culture est une préparation au sein de laquelle des micro-organismes peuvent se multiplier. Il doit donc satisfaire les exigences nutritives du micro-organisme étudié ce qui implique :

• couvrir les besoins en ions minéraux, en facteurs de croissance, apporter la source de carbone et d’énergie ;
• présenter un pH voisin du pH optimal ;
• présenter une force ionique optimale (le milieu peut être isotonique mais ce n’est pas obligatoire).

Il existe une grande variété de milieux de culture en rapport avec la diversité des exigences nutritives des micro-organismes. On distingue généralement :

• les milieux synthétiques de composition exactement connue, qualitativement et quantativement. Ces milieux sont surtout utilisés pour l’étude des bactéries autotrophes ou pour étudier les besoins nutritifs d’un germe. Ils sont rarement utilisés en routine à l’exception de quelques uns : Citrate de Simons, Citrate de Christensen, Urée-Tryptophane…
• Les milieux empiriques de composition connue seulement avec approximation car dépendant des matières premières utilisées : extrait de viande ou de levure, peptones, sucres et éventuellement liquides biologiques (sérum, sang…) mais qui conviennent aux micro-organismes étudiés. Ce sont les milieux les plus employés aujourd’hui. Exemple : LB, Columbia, Gassner, Tryptycase soja, Chocolat, …
• Milieu de Sabouraud : La gélose de Sabouraud constitue un milieu classique pour la culture, l’isolement et l’identification des levures et des moisissures saprophytes ou pathogènes. Elle est recommandée essentiellement pour l’isolement des moisissures dans les prélèvements peu chargés en bactéries, les contrôles de stérilité des produits pharmaceutiques, cosmétiques ou alimentaires, la culture des moisissures en vue de réaliser leur identification.
• Milieur de Hajna-Kligler : Le milieu de Hajna-Kligler est un milieu complexe, qui permet la recherche de plusieurs caractères biochimiques.
• Milieu King A et King B : Les milieux de King (milieu King A et milieu King B permettent de différencier entre elles les différences espèces du genrePseudomonas, par la mise en évidence de la production de pigments spécifiques.L’élaboration des pigments est influencée par la composition du milieu, ce qui justifie l’utilisation de deux milieux différents : King A et King B.
• Gélose PCA  La gélose glucosée à l’extrait de levure appelée par les Anglo-Saxons “Plate Count Agar” est utilisée en bactériolo­gie alimentaire pour le dénombrement des bactéries aérobies dans le lait, les viandes, les produits à base de viande, les autres produits alimentaires, ainsi que pour l’analyse des produits pharmaceutiques, des produits cosmétiques et de leurs matières premières.
• Bouillon BLBVB : Milieu de dénombrement des coliformes en microbiologie alimentaire (analyse des eaux et des aliments).
• Le milieu de culture dit différentiel ou indicateur permet de distinguer deux types de microorganismes se développant dans un même milieu¹. Ce type de milieu met en évidence certaines caractéristiques biochimiques des microorganismes (principalement l’aptitude à dégrader un substrat) en présence d’indicateur(s) de la réaction chimique : des indicateurs colorés de pH ou d’oxydo-réduction (tel que le rouge neutre, rouge de phénol, l’éosineou le bleu de méthylène).

On retrouve parmi les milieux différentiels :

• la gélose Hektoën, qui différencie la fermentation de 3 glucides (lactose, saccharose et salicine) ainsi que la production de sulfure d’hydrogène. Cette gélose est sélective des bacilles GRAM négatif, elle est particulièrement adaptée à la recherche d’entérobactéries pathogènes dans les selles.
• les géloses SS, XLD, DCL, TCBS sont aussi des milieux différentiels couramment utilisés.

Voici les différents milieux de culture :

• Baird Parker (gélose)
• Cétrimide
• Citrate de Simmons
• Cœur-Cervelle
• Columbia (Gélose)
• Columbia au sang / ANC
• Columbia au sang
• CTA (milieu)
• Eau peptonée
• EMB (gélose) (milieu de Lévine)
• EMB saccharosé (gélose) (milieu de Teague)
• Esculine (gélose)
• Extrait de malt (gélose à l’)
• Gélatine nutritive
• Gélose dextrosée à la pomme de terre
• Gélose nutritive
• Glucosé tamponné (bouillon)
• GVPC (gélose pour Legionella)
• Hektoen (gélose)
• Hypertonique (bouillon) (hypersalé)
• King A
• King B
• Kligler-Hajna
• Kristensen (gélose lactosée au vert brillant et au rouge de phénol)
• Lactosé au BCP / cloche
• Lactosé bilié au vert brillant / cloche (BLBVB)
• Lactosé au Tergitol 7 et au TTC (Gélose)
• Mannitol-Mobilité-Nitrate
• Mueller-Hinton (Gélose)
• Muller-Kauffmann (bouillon de base au tétrathionate)
• PCA standard ou gélose pour dénombrement
• PCB (gélose)
• Peptone
• Sabouraud(milieux à l’actidione, à la gentamicine, au chloramphénicol et/ou au tétrazolium)
• Salmonella-Shigella (Gélose SS)
• Sélénite (bouillon)
• Sérum de Bœuf coagulé (SBC)
• TCBS
• TGY et TY
• Gélose Trypticase soja
• TSC (Tryptone Sulfite Cyclosérine)
• TSN (Tryptone Sulfite Néomycine)
• Urée de Christensen
• Urée-tryptophane
• Vert brillant et Rouge de Phénol (Gélose)
• Viande Foie (gélose)
• Viande Levure (VL)
• VRBG
• VRBL
• XLD (Gélose)